题目内容：

如图所示为A、B、C三种质粒和一个含目的基因D的DNA片段示意图。图1中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因。图中EcoRⅠ、PvuⅠ为两种限制酶，质粒上限制酶括号内的数字表示限制酶切割位点与复制原点的距离。回答下列问题：

（1）图中三种质粒中不能作为目的基因运载体的是______，理由是______、______。

（2）在基因工程的操作过程中，需要检查目的基因是否重组到质粒中，应使用______酶切重组质粒，完全酶切后，进行电泳检测。若电泳图谱中出现长度为1.1kb和5.6kb，或者______kb和______kb的片段，则可判断该重组质粒已与目的基因重组成功。

（3）为研究目的基因D的功能，研究人员用图2所示的引物组合分别扩增D基因的D1片段、D3片段（DNA复制子链的延伸方向5′→3′）。

注：引物Ⅱ、Ⅲ上的x、y片段分别与N基因两端互补配对

①用引物Ⅰ、Ⅱ组合扩增后，得到的绝大部分DNA片段是图3中的______。

②将大量N基因片段与扩增得到的D1片段、D3片段置于PCR反应体系中进行扩增，得到的绝大多数扩增产物是______（填“D1-N”或“D1-D3-N”或“D3-N”或“D1-N-D3”）。