题目内容：

某蛋白质A为某真核生物中的一种糖蛋白，在医学临床上有重要的药用价值，现欲用基因工程技术，将控制该蛋白质合成的基因A转入到大肠杆菌中进行工厂化生产。请回答下列问题。

（1）获取基因A时，一般以基因A的mRNA为模板，在___________酶作用下合成单链DNA，形成RNA—DNA杂交分子，然后在酶作用下得到单链DNA，最后在DNA聚合酶作用下得到双链DNA。

（2）构建基因表达载体时，要用到“分子缝合针”是________________，其与DNA聚合酶在功能上的区别是______________________。

（3）基因在A细菌中表达出的蛋白质一般不具备天然状态下的活性，原因是______________________。若要检测大肠杆菌是否表达出蛋白质A可以通过___________检测。

（4）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有4种脱氧核糖核苷酸、耐热性的DNA聚合酶、___________（填两种）。