题目内容：

下表为几种限制酶识别的序列和切割的位点。如下图，己知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRI或PstI的酶切位点。现用PstI和EcoRI两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是

A．1为EcoRⅠ,2为BamHI,3为EcoRI,4为PstI

B．1为BamHI，2为EcoRI,3为EcoRI,4为PstI

C．1为BamHI,2为EcoRI,3为PstI,4为EcoRI

D．1为EcoRI,2为PstI，3为PstI,4为BamHI