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下图1为某种常用质粒的序列图,LacZ基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色,Ampr为氨苄青霉素抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题: ⑴若要筛选成功导入目的基因...
题目内容:
下图1为某种常用质粒的序列图,LacZ基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色,Ampr为氨苄青霉素抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题:
⑴若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有__________和___________。基因表达载体的组成除了目的基因外,还必须有_______、终止子和标记基因等。对获取的目的基因可用_________技术对其扩增。
⑵实验小组用BamHⅠ和BlgⅡ两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了__________;若大肠杆菌菌落显白色,说明导入了_________。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌_______(填“能”或“不能)在该培养基上生存。
⑶将若干个质粒和目的基因用BamHⅠ和BlgⅡ两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,若仅考虑质粒与目的基因相连接,会有________种连接方式。然后再用BamHⅠ和EcoRⅠ切割成功连接后的产物,获得了长度为0.8kb、3.8kb、1.1kb和3.5kb四种长度的DNA片段,则目的基因的长度为______kb(已知目的基因的长度大于2kb,1kb=1000个碱基对)。
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